重要な安全上の注意事項:
* 適切な個人用保護具(PPE)を着用: これには、手袋、安全性ゴーグル、白衣が含まれます。
* 換気の良いエリアでの作業: 一部の試薬は煙を放出する場合があります。
* 慎重に化学物質を扱う: 使用されるすべての化学物質については、材料安全データシート(MSDS)を参照してください。
* 化学廃棄物を適切に処分する: 危険な廃棄物処理に関する機関または自治体のガイドラインに従ってください。
* 代替案を考慮してください: 使いやすく、より安全な商用テストキットがあるかどうかを確認してください。
方法:ヨウ素解放法
この方法は、BPOがヨウ化イオン(I-)をヨウ素(I2)に酸化する能力に依存しています。その後、解放されたヨウ素は澱粉と反応して青色の複合体を形成します。青色の複合体は視覚的に観察したり、分光光度化したりします。
材料:
*小麦粉のサンプル
*ジエチルエーテルまたは石油エーテル(BPO抽出のための溶媒)
*氷河酢酸
*ヨウ化カリウム(KI)溶液(たとえば、蒸留水中の10%w/v)
*可溶性澱粉溶液(たとえば、蒸留水で1%w/v、新たに調製した)
*蒸留水
*ビーカー
*分離漏斗
*ろ紙
*分光光度計(オプション、定量分析用)
手順:
1。抽出:
*既知の量の小麦粉(たとえば、10g)をビーカーに計量します。
*小麦粉に適切な量のジエチルエーテルまたは石油エーテル(50mlなど)を追加します。この溶媒はBPOを溶解します。
*混合物を約15〜30分間徹底的に攪拌して、BPOを抽出します。
*ろ紙を通して混合物をろ過して、固体小麦粉粒子を除去します。ろ液を集めます。
*溶媒をヒュームフードで蒸発させ、抽出したBPOを残留物として残します。 エーテルが非常に可燃性であるため、エーテルを蒸発させるときは注意してください。 回転式蒸発器はこれに最適ですが、低温のホットプレートでの慎重な加熱も使用できます。
2。反応:
*残留物を少量の氷河酢酸(5mLなど)に溶解します。
*数滴のヨウ化カリウム(KI)溶液(1MLなど)を追加します。
*よく混ぜて、混合物を暗闇の中で5〜10分間放置します。
3。検出:
*新たに準備した澱粉溶液(1MLなど)の数滴を追加します。
*すぐに色の変化を観察します。青色はBPOの存在を示します。青色の強度は、存在するBPOの量に関連しています。
4。定性的分析と定量分析:
* 定性: 青色の存在または不在を単に観察してください。
* 定量的(分光光度測定):
*分光光度計が利用可能な場合、特定の波長(通常は580〜600 nm前後の青い溶液の吸光度を測定できます。ここで、青い澱粉ヨウ素錯体が強く吸収されます)。
*既知の濃度のBPO標準を使用してキャリブレーション曲線を準備し、同じ手順に従って青色を生成します。
*サンプルの吸光度をキャリブレーション曲線と比較して、元の小麦粉サンプルのBPOの濃度を決定します。
重要な考慮事項と注意:
* 干渉: 小麦粉に存在する他の酸化剤は、潜在的にテストを妨害し、誤検知につながる可能性があります。
* 感度: テストの感度は、使用される試薬の濃度と抽出の効率に依存します。
* キャリブレーション曲線: 定量分析では、正確な結果に適切なキャリブレーション曲線が重要です。分析グレードBPOを使用して、標準を準備します。
* コントロールサンプル: テストサンプルと一緒にBPOがないことが知られている小麦粉のコントロールサンプルを実行することが不可欠です。これにより、バックグラウンド干渉を特定するのに役立ちます。
* 安全性: ジエチルエーテルと石油エーテルは可燃性です。 ヒュームフードを使用して、開いた炎を避けてください。
* メソッド検証: この方法を規制目的で使用している場合、受け入れられた科学的基準(AOACなど)に従って方法を検証することが不可欠です。
* 代替方法: 高速液体クロマトグラフィー(HPLC)は、BPOを定量化するためのより洗練された敏感な方法です。 正確な定量化が必要な場合は、HPLCの使用を検討してください。
手順の概要:
1。抽出 ジエチルエーテルまたは石油エーテルを含む小麦粉からのBPO。
2。蒸発 残留物を残す溶媒。
3。溶解 氷河酢酸の残留。
4。反応 ヨウ素を解放するためにヨウ化カリウム(KI)を使用します。
5。 add 澱粉ソリューション。
6。観察 青色(定性的)の場合、または吸収性を測定(定量的)。
危険な材料の使用と干渉の可能性があるため、正確な結果が重要な場合は、この分析に実験室を使用することをお勧めします。