Dôležité bezpečnostné opatrenia:
* Noste vhodné osobné ochranné vybavenie (OOP): Patria sem rukavice, bezpečnostné okuliare a laboratórny plášť.
* Pracujte v dobre vetrannej oblasti: Niektoré reagenty môžu uvoľňovať výpary.
* Zvládajte chemikálie s opatrnosťou: Pre všetky použité chemikálie poraďte s dátovými hárkami materiálu (MSD).
* správne zlikvidovať chemický odpad: Postupujte podľa pokynov svojej inštitúcie alebo obce pre zneškodnenie nebezpečného odpadu.
* Zvážte alternatívy: Skontrolujte, či existujú komerčné testovacie súpravy, ktoré sa ľahšie a bezpečnejšie používajú.
Metóda:Metóda oslobodenia jódu
Táto metóda sa spolieha na schopnosť BPO oxidovať jodidové ióny (I-) na jód (I2). Oslobodený jód potom reaguje so škrobom za vzniku modrofarebného komplexu, ktorý je možné pozorovať vizuálne alebo kvantifikované spektrofotometricky.
Materiály:
* Vzorka múky
* Dietyléter alebo ropný éter (rozpúšťadlo pre extrakciu BPO)
* Ľadovec kyselina octová
* Roztok jodidu draselného (KI) (napr. 10% hm./obj. V destilovanej vode)
* Rozpustný roztok škrobu (napr. 1% hm/v v destilovanej vode, čerstvo pripravený)
* Destilovaná voda
* Kadičky
* Oddelený lievik
* Filtračný papier
* Spektrofotometer (voliteľný, pre kvantitatívnu analýzu)
Postup:
1. extrakcia:
* Vážte známe množstvo múky (napr. 10 g) do kadičky.
* Do múky pridajte vhodné množstvo dietyléter alebo ropného éteru (napr. 50 ml). Toto rozpúšťadlo rozpustí BPO.
* Zmes dôkladne premiešajte asi 15-30 minút, aby ste extrahovali BPO.
* Filtrujte zmes cez filtračný papier, aby ste odstránili tuhé častice múky. Zhromaždite filtrát.
* Odparí rozpúšťadlo v kapucni dymu a extrahovaný BPO nechajte ako zvyšok. Pri odparovaní éters používajte opatrnosť, pretože sú veľmi horľaví. Na to je ideálny otočný výparník, ale môže sa tiež použiť opatrné zahrievanie na horúcej doske pri nízkej teplote.
2. Reakcia:
* Rozpustite zvyšok v malom množstve ľadovej kyseliny octovej (napr. 5 ml).
* Pridajte niekoľko kvapiek roztoku jodidu draselného (KI) (napr. 1 ml).
* Dobre premiešajte a nechajte zmes stáť 5 až 10 minút v tme.
3. Detekcia:
* Pridajte niekoľko kvapiek čerstvo pripraveného roztoku škrobu (napr. 1 ml).
* Okamžite sledujte zmenu farby. Modrá farba označuje prítomnosť BPO. Intenzita modrej farby súvisí s množstvom prítomného BPO.
4. Kvalitatívna verzus kvantitatívna analýza:
* Kvalitatívne: Jednoducho sledujte prítomnosť alebo neprítomnosť modrej farby.
* kvantitatívne (spektrofotometria):
* Ak je k dispozícii spektrofotometer, môžete zmerať absorbanciu modrého roztoku pri špecifickej vlnovej dĺžke (zvyčajne okolo 580-600 nm, kde komplex modrého škrobu-jódu silne absorbuje).
* Pripravte kalibračnú krivku pomocou známych koncentrácií štandardov BPO a postupujte podľa rovnakého postupu, aby ste vytvorili modrú farbu.
* Porovnajte absorbanciu vašej vzorky s kalibračnou krivkou, aby ste určili koncentráciu BPO v pôvodnej vzorke múky.
Dôležité úvahy a poznámky:
* interferencie: Iné oxidačné činidlá prítomné v múke by mohli potenciálne interferovať s testom, čo vedie k falošným pozitívom.
* Citlivosť: Citlivosť testu závisí od koncentrácií použitých reagentov a účinnosti extrakcie.
* Kalibračná krivka: Pre kvantitatívnu analýzu je pre presné výsledky kľúčová správna kalibračná krivka. Na prípravu svojich štandardov použite BPO analytickej kvality.
* Kontrolné vzorky: Je nevyhnutné spustiť kontrolnú vzorku múky, o ktorej je známe, že je bez BPO popri vašej testovacej vzorke. To pomáha identifikovať akékoľvek rušenie pozadia.
* bezpečnosť: Dietyléter a petroleum éter sú horľavé. Použite kapucňu dymu a vyhnite sa otvoreným plameňom.
* Overenie metódy: Ak túto metódu používate na regulačné účely, je nevyhnutné overiť metódu podľa akceptovaných vedeckých štandardov (napr. AOAC).
* Alternatívne metódy: Vysoko výkonná kvapalina chromatografia (HPLC) je sofistikovanejšia a citlivejšia metóda na kvantifikáciu BPO. Ak je potrebná presná kvantifikácia, zvážte použitie HPLC.
Zhrnutie krokov:
1. extrakt BPO z múky s dietyléterom alebo ropným éterom.
2. odparujte Rozpúšťadlo opustiť zvyšky.
3. rozpustite Zvyšok v ľadovej kyseline octovej.
4. React s jodidom draselným (KI) na oslobodenie jódu.
5. Pridajte Riešenie škrobu.
6. pozorovať pre modrú farbu (kvalitatívna) alebo meraná absorbancia (kvantitatívna).
Z dôvodu použitia nebezpečných materiálov a potenciálu interferencií sa odporúča použiť laboratórium na túto analýzu, ak sú dôležité výsledky.