Précautions de sécurité importantes:
* Portez un équipement de protection personnel approprié (EPI): Cela comprend des gants, des lunettes de sécurité et une blouse de laboratoire.
* Travaillez dans une zone bien ventilée: Certains réactifs peuvent libérer des fumées.
* Gérer les produits chimiques avec soin: Consultez les fiches techniques de sécurité des matériaux (MSD) pour tous les produits chimiques utilisés.
* disposer correctement des déchets chimiques: Suivez les directives de votre établissement ou de votre municipalité pour l'élimination des déchets dangereux.
* Considérez les alternatives: Vérifiez s'il y a des kits de test commerciaux plus faciles et plus sûrs à utiliser.
Méthode:Méthode de libération de l'iode
Cette méthode repose sur la capacité du BPO à oxyder les ions iodure (I-) à l'iode (I2). L'iode libéré réagit ensuite avec l'amidon pour former un complexe de couleur bleue, qui peut être observé visuellement ou quantifié par spectrophotométrie.
Matériaux:
* Échantillon de farine
* Éther de diéthyle ou éther de pétrole (solvant pour l'extraction du BPO)
* Acide acétique glaciaire
* Solution d'iodure de potassium (KI) (par exemple, 10% p / v dans l'eau distillée)
* Solution d'amidon soluble (par exemple, 1% p / v dans l'eau distillée, fraîchement préparée)
* Eau distillée
* Béchers
* Entonnoir de séparation
* Papier de filtre
* Spectrophotomètre (facultatif, pour analyse quantitative)
Procédure:
1. Extraction:
* Pesez une quantité connue de farine (par exemple, 10g) dans un bécher.
* Ajouter une quantité appropriée d'éther diéthylique ou d'éther de pétrole (par exemple, 50 ml) à la farine. Ce solvant dissoudra le BPO.
* Incorporer soigneusement le mélange pendant environ 15-30 minutes pour extraire le BPO.
* Filtrez le mélange à travers du papier filtre pour éliminer les particules de farine solide. Récupérer le filtrat.
* Évaporez le solvant dans un capot de fumée, laissant le BPO extrait comme résidu. Utilisez la prudence lors de l'évaporation des éthers car ils sont très inflammables. Un évaporateur rotatif est idéal pour cela, mais un chauffage minutieux sur une plaque chauffante à basse température peut également être utilisé.
2. Réaction:
* Dissolvez le résidu dans une petite quantité d'acide acétique glaciaire (par exemple, 5 ml).
* Ajoutez quelques gouttes de solution d'iodure de potassium (Ki) (par exemple, 1 ml).
* Bien mélanger et laisser le mélange se tenir debout pendant 5 à 10 minutes dans l'obscurité.
3. Détection:
* Ajoutez quelques gouttes de solution d'amidon fraîchement préparée (par exemple, 1 ml).
* Observez immédiatement le changement de couleur. Une couleur bleue indique la présence de BPO. L'intensité de la couleur bleue est liée à la quantité de BPO présente.
4. Analyse qualitative vs quantitative:
* qualitatif: Observez simplement la présence ou l'absence de la couleur bleue.
* quantitatif (spectrophotométrie):
* Si un spectrophotomètre est disponible, vous pouvez mesurer l'absorbance de la solution bleue à une longueur d'onde spécifique (généralement autour de 580 à 600 nm, où le complexe d'amidon bleu absorbe fortement).
* Préparez une courbe d'étalonnage en utilisant des concentrations connues de normes BPO et suivez la même procédure pour générer la couleur bleue.
* Comparez l'absorbance de votre échantillon à la courbe d'étalonnage pour déterminer la concentration de BPO dans l'échantillon de farine d'origine.
Considérations et notes importantes:
* Interférences: D'autres agents oxydants présents dans la farine pourraient potentiellement interférer avec le test, conduisant à de faux positifs.
* Sensibilité: La sensibilité du test dépend des concentrations des réactifs utilisés et de l'efficacité de l'extraction.
* Courbe d'étalonnage: Pour l'analyse quantitative, une courbe d'étalonnage appropriée est cruciale pour des résultats précis. Utilisez le BPO de qualité analytique pour préparer vos normes.
* Échantillons de contrôle: Il est essentiel d'exécuter un échantillon de contrôle de farine connue pour être exempt de BPO aux côtés de votre échantillon de test. Cela aide à identifier toute interférence de fond.
* Sécurité: L'éther diéthylique et l'éther de pétrole sont inflammables. Utilisez un capot de fumée et évitez les flammes ouvertes.
* Validation de la méthode: Si vous utilisez cette méthode à des fins de réglementation, il est essentiel de valider la méthode selon les normes scientifiques acceptées (par exemple, AOAC).
* Méthodes alternatives: La chromatographie liquide haute performance (HPLC) est une méthode plus sophistiquée et sensible pour quantifier le BPO. Si une quantification précise est nécessaire, envisagez d'utiliser HPLC.
Résumé des étapes:
1. Extrait BPO de la farine avec de l'éther diéthylique ou de l'éther de pétrole.
2. Évaporer le solvant pour laisser un résidu.
3. dissoudre le résidu dans l'acide acétique glaciaire.
4. react avec l'iodure de potassium (Ki) pour libérer l'iode.
5. Ajouter Solution d'amidon.
6. Observer pour la couleur bleue (qualitative) ou mesurer l'absorbance (quantitative).
En raison de l'utilisation de matières dangereuses et du potentiel d'interférences, il est recommandé d'utiliser un laboratoire pour cette analyse si des résultats précis sont importants.